高糖促进成年大鼠心脏成纤维细胞periostin 表达及其信号转导机制

心肌纤维化是糖尿病心肌病时心室舒缩功能障碍的主要机制之一。心脏成纤维细胞分泌的一种细胞外基质蛋白periostin 与心肌纤维化及间质重塑密切相关。本研究旨在观察高糖对心脏成纤维细胞periostin 表达的影响及其相关信号转导机制。在离体培养的成年大鼠心脏成纤维细胞，采用低糖(5.5 mmol/L)和高糖(25 mmol/L)干预，RT-PCR 检测periostinmRNA 表达，免疫印迹法检测periostin 蛋白表达，荧光法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)含量。结果显示，高糖刺激12 h 可使periostin mRNA表达增加117.26%，刺激24 h 可使其蛋白表达上调93.12%，高糖刺激30 min 可显著促进心脏成纤维细胞内ROS 的产生，蛋白激酶C (protein kinase C, PKC)抑制剂白屈菜红碱可减少高糖诱导的ROS 生成增加。高糖诱导的periostin 蛋白表达增加可被白屈菜红碱或ROS 清除剂N- 乙酰-L- 半胱氨酸(N-acetylcysteine, NAC)所抑制。高糖刺激30 和60 min 可显著增加磷酸化c-Jun 氨基末端激酶(c-jun N-terminal protein kinase, JNK)的含量，应用白屈菜红碱或NAC 可抑制高糖诱导的磷酸化JNK 含量增加。JNK 抑制剂SP600125 预孵育明显抑制了高糖诱导的periostin 蛋白表达增加。上述结果提示，高糖刺激可促进periostin 的mRNA和蛋白表达，激活PKC/ROS/JNK 通路介导高糖诱导的periostin 表达增加。