尾加压素II 抑制葡萄糖激酶的表达和葡萄糖诱导的胰岛素分泌

本研究旨在探讨尾加压素II (urotensin II, UII)对胰岛β 细胞功能的影响及其机制。在整体实验中，采用Wistar 大鼠进行糖耐量试验，检测不同剂量UII (3、30、300 nmol/kg)对大鼠血糖和胰岛素水平的影响；在细胞实验中，βTC-6细胞孵育实验检测UII 对葡萄糖引起的胰岛素分泌(glucose-induced insulin secretion, GIIS)的影响，酸化乙醇抽提法和实时荧光定量PCR 分别测定细胞内胰岛素含量和mRNA的水平，Western blot 检测胰十二指肠同源盒1 (pancreatic duodenal homeobox-1,PDX-1)和葡萄糖激酶(glucokinase, GCK)表达水平。糖耐量试验结果显示，相对对照组，急性静脉注射较高剂量的UII (30、300 nmol/kg)使大鼠血浆胰岛素浓度在腹腔注射葡萄糖后15 min 显著下降，并且使大鼠血糖在腹腔注射葡萄糖后90 min 明显升高。βTC-6 细胞孵育实验结果显示，UII 孵育2 h 能抑制βTC-6 细胞的GIIS，但是对细胞内的胰岛素含量和mRNA 水平没有影响。UII 对GIIS 的抑制作用可以被UII 受体拮抗剂urantide 所阻断，部分被蛋白激酶C (protein kinase C, PKC)非特异性抑制剂chelerythrine chloride (CTC)和生长抑素受体非特异性拮抗剂cyclosomatostatin (CSS)所阻断。Western blot 结果显示，UII 抑制了βTC-6 细胞内GCK 的表达，但对PDX-1 表达量没有影响。以上结果表明，UII 通过激活其特异性受体(较高浓度的UII 可能同时激活生长抑素受体)抑制胰岛β 细胞GIIS，其作用机制涉及PKC 通路的激活、GCK 表达受抑所引起的胰岛素颗粒胞吐作用的减弱，但不涉及胰岛素本身表达的下降。