小凹蛋白-1通过激活p38 MAPK抑制巨噬细胞内质网应激凋亡

本文旨在探讨小凹蛋白-1 (caveolin-1, Cav-1)对巨噬细胞内质网应激凋亡途径的调控作用及机制。用毒胡萝卜素(thapsigargin, TG)诱导RAW264.7细胞内质网应激后，Western blot法检测Cav-1的表达变化。用小凹(caveolae)结构破坏剂filipin(III)预处理RAW264.7细胞，用Annexin V-FITC/PI双染和激光共聚焦显微镜观察RAW264.7细胞的凋亡情况，最后使用Western blot法检测凋亡相关蛋白——丝裂原激活蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)家族成员p38的磷酸化及C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein, CHOP)表达水平。结果显示，TG作用RAW264.7细胞可使Cav-1的表达呈山峰状改变，TG作用早期Cav-1的表达升高，其中1 μmol/L TG作用RAW264.7细胞24 h可使Cav-1的表达较对照组明显升高(P < 0.05)，随着TG作用浓度和时间的增加，Cav-1的表达降低。Filipin(III) (2.5 μg/mL)预处理RAW264.7细胞(30 min)可阻断TG诱导的Cav-1表达上调(P < 0.05)，同时，流式细胞仪检测结果显示filipin(III)使TG诱导的细胞凋亡率升高(P < 0.05)，激光共聚焦显微镜下可见明显凋亡形态变化，Western blot结果显示Filipin(III)使TG诱导的p-p38减少(P < 0.05)，而CHOP的表达无明显改变(P > 0.05)。以上结果提示，Cav-1可抑制巨噬细胞的内质网应激凋亡途径，其机制可能与激活p38 MAPK通路有关。