S100钙结合蛋白A16通过内质网应激促进HepG2细胞脂肪合成

本研究旨在探讨S100钙结合蛋白A16 (S100 calcium binding protein A16, S100A16)在肝细胞脂质代谢中的作用及可能的生物学机制。用脂肪酸培养HepG2细胞(人肝癌细胞系)以建立脂肪酸培养模型，对照模型不加脂肪酸培养，每一模型分成3组细胞，分别用S100a16过表达质粒、shRNA质粒、Vector质粒转染。用试剂盒检测细胞甘油三酯浓度，用油红O染色观察脂滴聚集情况，用免疫沉淀和质谱分析寻找和S100A16相互作用的兴趣蛋白，并用免疫共沉淀验证，用Western blot和qRT-PCR进行相关机制研究。结果显示，和对照模型相比，脂肪酸培养模型细胞内脂肪和甘油三酯浓度显著增加。S100a16过表达组细胞内脂肪积累显著高于Vector质粒转染组。热休克蛋白A5 (heat shock protein A5, HSPA5)与S100A16之间存在相互作用。S100a16过表达可上调内质网应激的HSPA5/肌醇依赖酶1α-X结合蛋白1 (inositol-requiring enzyme 1α-X binding protein 1, IRE1α-XBP1)通路相关蛋白(HSPA5、IRE1α和pIREα1)表达水平，并上调脂肪合成相关基因Srebp1c、Acc和Fas mRNA表达水平，而转染S100A16 shRNA质粒可使上述蛋白和mRNA水平低于Vector质粒转染组。以上结果提示，S100A16可能通过内质网应激HSPA5/IRE1α-XBP1通路促进HepG2细胞脂质合成