TRPC6在低氧高二氧化碳肺动脉平滑肌细胞增殖、凋亡中的作用

本文旨在探讨TRPC6在低氧高二氧化碳性肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells, PASMCs)增殖和凋亡中的作用。原代培养Sprague-Dawley (SD)雄性大鼠PASMCs，采用平滑肌α-肌动蛋白免疫荧光染色法鉴定。选用4~6代的PASMCs，加入无血清DMEM饥饿24 h，随机分为5组：常氧组、低氧高二氧化碳组、DMSO组、TRPC6抑制剂SKF-96365组和TRPC6激动剂OAG组。常氧组置于37 °C常氧培养箱(21% O2, 5% CO2)中培养24 h，其余4组置于37 °C低氧高二氧化碳培养箱(5% O2, 6% CO2)中，用不同药物处理24 h。用逆转录聚合酶链式反应和Western blot分别检测TRPC6 mRNA和蛋白的表达；用CCK-8法检测细胞增殖情况；用原位末端标记法检测细胞凋亡；用Fura 2-AM双波长法检测细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)。结果显示，低氧高二氧化碳条件下，PASMCs的TRPC6 mRNA和蛋白表达上调，[Ca2+]i升高，细胞增殖增加，而凋亡减少；OAG可促进低氧高二氧化碳的上述作用，而SKF-96365能够逆转这些作用。以上结果提示，TRPC6参与了低氧高二氧化碳对PASMCs增殖和凋亡的调节