硝普钠对SH-SY5Y细胞中F-box富含亮氨酸重复蛋白5和铁调节蛋白2表达的调节作用

帕金森病(Parkinson’s disease, PD)患者早期铁选择性聚集在黑质致密带，残存的多巴胺能神经元内铁含量增高，说明铁升高可能是PD发生的一个关键因素。铁调节蛋白(iron regulatory proteins, IRPs) IRP1和IRP2可与铁转运和储存蛋白中的铁反应元件相结合，对维持细胞铁稳态起重要作用。F-box富含亮氨酸重复蛋白5 (F-box and leucine-rich repeat protein 5, FBXL5)通过泛素蛋白酶体途径降解IRP2而参与铁代谢的调控。有研究显示一氧化氮(nitric oxide, NO)能够增强IRP1的活性，但对IRP2的表达影响尚未明确。本研究选择NO的供体硝普纳(sodium nitroprusside, SNP)作为处理药物，研究其对体外培养的SH-SY5Y细胞内FBXL5和IRP2蛋白表达的影响。细胞活力检测结果显示SNP可剂量依赖性地损伤SH-SY5Y细胞，降低细胞存活率。流式细胞术结果显示，经过100和300 μmol/L的SNP处理后，细胞线粒体膜电位分别降低45%和60%。此外，Western blotting结果显示300 μmol/L SNP能够引起细胞内FBXL5的蛋白表达量升高39%，而使IRP2的蛋白表达量降低46%。以上结果提示，SNP可造成SH-SY5Y细胞的线粒体功能障碍，并上调FBXL5的表达和下调IRP2的表达