小鼠子宫珠蛋白结合蛋白的生物信息学分析及其多克隆抗体制备

本文旨在制备小鼠子宫珠蛋白结合蛋白(mouse uteroglobin binding protein, mUGBP)多克隆抗体，为后续研究工作奠定基础。通过生物信息学分析方法预测mUGBP蛋白的跨膜结构、理化特性、疏水性等因素，设计出两段多肽，分别与匙孔戚血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin, KLH)交联后免疫新西兰兔，结果显示其中一个含13个氨基酸残基的多肽序列(221st~233rd)可用作抗原免疫动物，并成功获得高效价的抗mUGBP多克隆抗体。通过ELISA法检测其效价为1:108，亲和层析纯化后Western blot检测抗体特异性，并将制备的抗体应用于免疫印迹及人和小鼠肺组织免疫组织化学和免疫荧光检测，结果显示本研究制备的抗体具有特异性，且用该抗体成功在人和小鼠气道上皮细胞和肺血管内皮细胞检测到UGBP蛋白表达。结果表明，本研究通过生物信息学方法成功预测了抗原表位，并据此预测成功制备了高效价、高特异性的抗mUGBP多克隆抗体