葡萄糖氧化酶-过氧化氢酶共固定研究

以弱碱性阴离子交换树脂D301T为载体，对过氧化氢酶（CAT）和葡萄糖氧化酶（GOD）两种酶进行分次固定，并对固定化条件进行了优化。所得最佳工艺条件为：共固定化酶采用先固定CAT，再固定GOD的顺序进行，其中CAT 0.5 mL，GOD 0.25 mL。所得CAT蛋白结合量为1.07 mg/g，固定化效率为46.71%；GOD蛋白结合量为1.58 mg/g，固定化效率为43.62%；每mL GOD酶液的表观酶活为47.98 U/mL，每g载体中GOD的酶活为12.0 U/g。以戊二醛作为交联剂，体积分数取0.5%，交联时间取15 min时，所得固定化酶表观酶活达到最大值，为14.66 U/g，固定化酶连续反应10批后，其酶活为初始值的85.3%，显示出固定化酶具有良好的操作稳定性。