D-甘露糖异构酶在大肠杆菌中的表达及催化条件的研究

根据已知的放射性土壤杆菌体内的D-甘露糖异构酶（Fmi）氨基酸序列，设计适合在大肠杆菌内表达的Fmi基因序列（1245bp），采用体外基因拼接合成。构建了表达Fmi的重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET30-Fmi，诱导表达的Fmi蛋白经SDS-PAGE验证为可溶性蛋白，分子量44000。通过实验优化了Fmi的催化条件，结果表明Fmi催化的最适pH值为7.5，最适温度为45℃，催化1h酶活达5.29U/mL。以25%的果糖溶液为底物时，催化2h果糖转化率达29.4%。