反馈激活STAT3调控HER2阳性乳腺癌细胞拉帕替尼耐药的机制

摘要 目的 探讨白介素-6（IL-6）在HER2阳性BT-474 乳腺癌细胞拉帕替尼耐药中的作用及其相关分子机制。方法 建立BT-474耐拉帕替尼细胞株（BT-474R）。Western blot检测耐药标志蛋白P-gp的表达，MTT法检测BT-474R细胞的IC50。Caspase-Glo? 3/7法检测拉帕替尼BT-474R与BT-474细胞的Caspase3/7酶活性的变化。Western blot法检测IL-6、p-STAT3、STAT3、Cleaved Caspase 3的蛋白表达水平；RNAi法沉默STAT3基因表达；Caspase-Glo? 3/7法和Annexin V-FITC/PI染色检测沉默后细胞凋亡程度。结果 BT-474R组P-gp表达水平显著高于BT-474组（P<0.05）。 拉帕替尼增强STAT3活性，沉默STAT3基因可恢复BT-474R细胞对拉帕替尼的敏感度、增加cleaved caspase 3蛋白表达水平和Caspase3/7 酶的活性（P<0.01）。沉默STAT3增强了拉帕替尼诱导的耐药细胞凋亡（P<0.01）。拉帕替尼诱导的IL-6表达和分泌激活STAT3，用IL-6抗体抑制拉帕替尼诱导的IL-6，可以阻止拉帕替尼刺激STAT3活性。结论 拉帕替尼通过诱导BT-474细胞分泌IL-6激活STAT3信号通路，增加HER2阳性乳腺癌细胞对拉帕替尼的耐药性