siRNA下调RYR1表达对小鼠成肌细胞中线粒体的影响

摘要 目的：探讨雷诺丁受体1（RYR1）表达下调对小鼠成肌细胞C2C12中线粒体的影响及其发生机制。方法：采用小干扰RNA（siRNA）敲减C2C12细胞的RYR1表达，应用透射电镜对线粒体进行体视学分析，观察细胞内线粒体数目和形态学的改变，应用real-time PCR和Western blot方法检测线粒体融合蛋白2（Mfn2）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α（PGC-1α）和细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）的mRNA及蛋白水平的改变。结果：RYR1敲减（KD）组RYR1的mRNA水平显著降低（P<0.01）。阴性对照（NC）组及空白对照（BC）组线粒体维持长管状结构，而KD组线粒体呈碎片化改变。与NC组相比，KD组的线粒体数目呈增加趋势（差异无统计学显著性），线粒体面积和周长显著减少（P<0.05）。KD组的Mfn2在mRNA和蛋白水平均显著降低（P<0.01），而PGC-1α在mRNA水平显著降低（P<0.01），在蛋白水平未见明显差异；ERK1/2在mRNA水平和蛋白水平的差异均无统计学显著性，也未检测到磷酸化ERK1/2的水平变化。结论：敲减RYR1表达可以导致C2C12细胞线粒体的形态改变，Mfn2表达下调可能参与其发生，而PGC-1α及ERK1/2相关的氧化应激通路可能在其中不发挥主要作用。 服务 把本文推荐给朋友 加入我的书架 加入引用管理器 E-mail Alert RSS 作者相关文章 王天爽 张静 任雅丽 常杏芝 服务 作者相关文章