CD137信号通过有氧糖酵解途径促进小鼠肺动脉内皮细胞增殖

摘要 目的：探讨CD137信号是否通过调控有氧糖酵解途径促进小鼠肺动脉内皮细胞（PAECs）增殖。方法：将小鼠PAECs分组如下：（1）空白对照组、同型对照组、刺激因子TNF-α（10 μg/L）组、ET-1（10 mmol/L）和5-HT（1 μmol/L）组，各组刺激细胞24 h；（2）选择TNF-α刺激细胞24 h后分为对照组、CD137激动剂组（CD137L重组蛋白5 mg/L，激动CD137-CD137L信号）、c-Myc抑制剂组（c-Myc抑制剂10074-G5 10 μmol/L，DMSO溶解，预处理细胞30 min，再加入CD137L重组蛋白）和DMSO组（加入与c-Myc抑制剂组等量DMSO预处理细胞30 min，再予CD137L重组蛋白刺激）；（3） TNF-α刺激细胞24 h后分为对照组、CD137激动剂组和2-脱氧葡萄糖（2-DG）组（10 mmol/L糖酵解抑制剂2-DG预处理细胞30 min，再加入CD137L重组蛋白）。分别采用流式细胞术及Western blot检测细胞CD137膜蛋白及总蛋白表达。Western blot及酶学分析分别检测细胞己糖激酶（HK2）、6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2，6-二磷酸酶3（PFKFB3）和c-Myc蛋白表达及酶活性。葡萄糖氧化酶法及乳酸脱氢酶比色法检测细胞葡萄糖摄取量及乳酸水平。CCK-8法和EdU法检测细胞增殖。结果：与对照组相比，刺激因子TNF-α、ET-1及5-HT刺激24 h可明显增加PAECs的CD137膜蛋白及总蛋白的表达（P<0.05）。CD137激动剂组细胞HK2及PFKFB3蛋白表达及酶活性显著高于对照组；CD137激动剂组细胞乳酸水平高于对照组，葡萄糖消耗较对照组多（P<0.05）。激活CD137信号后PAECs的c-Myc蛋白表达高于对照组，而应用c-Myc抑制剂10074-G5可显著抑制CD137信号的促糖酵解作用（P<0.05）。CCK-8及EdU增殖试验显示激活CD137信号可显著促进PAECs增殖，有氧糖酵解抑制剂2-DG可抑制其促细胞增殖作用（P<0.05）。结论：CD137信号可能通过上调c-Myc增强小鼠PAECs有氧糖酵解，进而促进细胞增殖。 服务 把本文推荐给朋友 加入我的书架 加入引用管理器 E-mail Alert RSS 作者相关文章 蒋美萍 陈蕊 刘培晶 严金川 服务 作者相关文章