中药单体小檗碱靶向降解CML特征性蛋白BCR-ABL及其机制的研究

摘要 目的：探讨中药单体小檗碱在慢性粒细胞白血病（CML）中的靶标及其降解CML特征性蛋白BCR-ABL的机制。方法：实验分为小檗碱处理组和非处理组，通过分子模拟对接的方法预测小檗碱在CML中的直接靶标是否为其特征性蛋白BCR-ABL；通过表面等离子体共振成像（SPRi）的方法验证小檗碱与ABL1蛋白的结合。Western blot验证小檗碱作用后BCR-ABL表达量的变化，以及CML细胞内泛素化蛋白酶体途径和BCR-ABL蛋白泛素化的变化。结果：分子模拟对接结果表明，小檗碱可以和ABL1蛋白结合；SPRi实验结果显示小檗碱可以直接和ABL1蛋白的SH3-SH2、PTK及F-actin结构域结合。根据前期实验结果，我们选取5 μmol/L小檗碱处理CML细胞4、12和24 h后，Western blot结果显示小檗碱可以时间依赖性地降解CML特征性蛋白BCR-ABL（P<0.05）。小檗碱处理CML细胞后，Western blot结果显示小檗碱可以显著促进细胞的泛素化水平；针对BCR-ABL的免疫沉淀结果显示，小檗碱作用后细胞中BCR-ABL蛋白的泛素化水平显著增强。结论：小檗碱直接靶向CML特征性蛋白BCR-ABL，并且通过增强泛素化蛋白酶体途径来降解BCR-ABL蛋白。 服务 把本文推荐给朋友 加入我的书架 加入引用管理器 E-mail Alert RSS 作者相关文章 费雲昊 阴钊 丰茂晓 刘燕君 费嘉 服务 作者相关文章