基于分子发夹/荧光微球的侧向层析法定量检测黄曲霉毒素B1

基于分子发夹/荧光微球探针构建了一种侧向层析定量检测黄曲霉毒素B1（AFB1） 的新方法。一条含有AFB1适配体的分子发夹与荧光微球偶联后，形成的标记探针被喷涂在试纸条的结合垫上。一条5′端含有链霉亲和素的寡核苷酸序列包被在硝酸纤维素膜的检测线上，另一条包含有AFB1适配体互补链的寡核苷酸序列包被在硝酸纤维素膜的质控线上。当待测样本中含有AFB1时，AFB1先与标记物结合垫处标记探针中的AFB1适配体结合，同时，标记探针中的DNA分子发夹‘茎’的双链被打开，AFB1与标记探针形成的复合物层析到反应膜的检测区时，被检测区的寡核苷酸序列捕获，检测区出现亮线。利用该原理，通过一个“off-on”的光信号，实现了对AFB1的高灵敏检测。实验结果表明，AFB1在0.1~50 μg/L质量浓度范围内，检测线处的荧光强度（T）和质控线荧光强度（C）的比值与AFB1质量浓度呈良好的线性关系，检出限（S/N=3）达0.05 μg/L,且具有很高特异性，可实现对实际样品中AFB1的准确检测