高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨率质谱检测酱油中的4-甲基咪唑与2-甲基咪唑

建立了高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨率质谱测定酱油中4-甲基咪唑（4-MI）和2-甲基咪唑（2-MI）的方法。酱油样品经水稀释，过MCX固相萃取小柱，经5%的氨化甲醇洗脱后，于45 ℃下氮气吹干，用乙腈水溶液溶解残渣，涡旋充分混合后过0.45 μm滤膜。采用Agilent HILIC Plus（2.1 mm×100 mm，3.5 μm）色谱柱进行分离，以乙腈-5.0 mmol/L乙酸铵（80∶20）为流动相进行等度洗脱。质谱采用正离子模式，在质荷比（m/z） 50~100范围内通过高分辨质谱全扫描模式提取目标化合物的精确质量数，以一级母离子为定量离子，外标法定量。在所建立的色谱条件下，4-MI和2-MI能够得到较好的分离。该方法对4-MI和2-MI的检出限可达2.5 mg/kg。在25~500 ng/mL浓度范围内线性关系良好，相关系数均大于0.99。对生抽、老抽、黄豆酱油及有机酱油中4-MI和2-MI进行3个水平的加标实验，平均回收率为78.3%~95.7%，相对标准偏差（RSD）不大于9.4%。该方法样品处理过程简单，适用于酱油中4-MI和2-MI的测定，对规范酱油生产和焦糖色素的加入具有重要意义