重组真菌腈水解酶的发酵工艺条件及生物催化特性初探【需加急】

对产真菌腈水解酶的重组大肠杆菌的培养基种类、培养基成分、诱导剂种类和浓度、诱导条件、pH和温度进行了系统考察。摇瓶发酵优化结果显示：以甘油作为主要碳源，蛋白胨和酵母膏作为主要氮源，并添加微量元素的SOC培养基作为发酵培养基，最适接种量为0.5%（v/v）；较优的诱导剂诱导条件为：采用0.5 mmol/L的IPTG诱导12 h，发酵pH为7.5，诱导温度25 ℃时产酶效果最佳。经过优化后，重组酶的酶活得到了显著提高，总酶活达到了3.8 U/mL，相比初始水平（0.84 U/mL）提高约4倍。5 L发酵罐的放大实验表明，产酶效果良好，总酶活和比酶活均与摇瓶水平基本持平。全细胞催化性质考察研究结果表明，该菌株所产腈水解酶催化反应的最适催化反应温度是45 ℃，最适反应pH约为7.2