美洲鲥hsp70的分子特征及其对运输应激的应答

运用同源克隆和cDNA末端快速扩增（RACE）技术获取了美洲鲥（Alosa sapidissima）热应激蛋白70（hsp70）的全长cDNA序列，其总长度为2 545 bp，开放阅读框（ORF）为1 914 bp，推测编码637个氨基酸，其氨基酸的二级结构含有HSP70家族的3个特征序列。氨基酸同源性分析显示，美洲鲥hsp70与墨西哥脂鲤（Astyanax mexicanus）等鱼类的相似性达84%以上，与脊椎动物果蝇（Drosophila auraria）及大肠杆菌（Escherichia coli）的相似性分别为73%和38%。荧光定量PCR检测显示，该基因在美洲鲥鳃、肌肉、头肾中高表达，在脑和心中相对高表达，在肝、脾、肠、肾中微量表达。采用荧光定量PCR方法研究运输应激对美洲鲥未经繁殖的亲鱼hsp70 mRNA水平的影响，在运输实验中鳃、肝hsp70 mRNA水平呈先升高后降低的变化趋势，头肾hsp70 mRNA水平呈现递增趋势。该结果表明克隆到的基因符合诱导型hsp70的特点，而且美洲鲥鳃、肝、头肾组织的hsp70 mRNA对运输应激表现出明显的应答作用