鸻形目鸟类线粒体基因组测序策略

鸻形目（Charadriiformes），全世界约有384个物种，分属于19科94属，种类繁多、分布广泛，是研究迁徙和觅食行为的良好材料。近年来，线粒体基因组的研究快速发展，由于样品难以收集，缺乏系统的测序策略，鸻形目鸟类线粒体基因组的研究相对滞后。引物设计对聚合酶链式反应（PCR）至关重要，一个成功的PCR实验依赖于高质量的特异性引物，本研究拟设计一套用于鸻形目鸟类线粒体基因组扩增的通用引物。对GenBank中现有的鸻形目物种线粒体基因组进行多重比对，发现若干个保守性区域，本研究在该区域设计13对扩增鸻形目鸟类线粒体基因组的通用引物，扩增的目的片段长度均在1.5 kb左右。我们选取4个物种，即灰头麦鸡（Vanellus cinereus）、丘鹬（Scolopax rusticola）、白腰草鹬（Tringa ochropus）和针尾沙锥（Gallinago stenura），进行PCR扩增验证，设计的引物在4个物种中均能顺利扩增、测序，该引物在鸻形目鸟类线粒体基因组扩增中的具有普遍适用性。本研究设计的13对通用引物在扩增鸻形目物种线粒体全基因组中具有较强的应用价值，将为鸻形目的系统发育关系、种群遗传学和生物地理学研究提供珍贵的资源