Xist敲降可以改善孤雄单倍体囊胚质量

单倍体胚胎干细胞研究一直以来吸引着研究者们的注意，它可以用作基因修饰的工具或是用于药物筛选。随着孤雄胚胎干细胞系的成功建立，更扩展了单倍体胚胎干细胞的应用前景。但单倍体孤雄胚胎发育率低，胚胎质量差，制约着孤雄单倍体胚胎干细胞的建系。为改善孤雄单倍体胚胎发育潜能及胚胎干细胞建系效率低的问题，我们检测了小鼠（Mus musculus domesticus）孤雄单倍体胚胎的体外发育过程和该过程中Xist基因表达情况。结果发现，孤雄单倍体胚胎囊胚发育率只有10% ~ 14%，发育至囊胚所需时间差异较大，从3.5 ~ 5.5 d不等。通过核糖核酸荧光原位杂交实验（RNA-FISH）跟踪Xist基因表达情况，发现其在发育至囊胚阶段的胚胎中呈抑制状态，而在早期胚胎中多呈表达状态。通过siRNA扰低Xist表达，虽然没有改变孤雄单倍体胚胎发育到囊胚的比例，但显著提高了囊胚质量，并提高了接种胚胎内细胞团（ICM）后建立细胞系的效率。结果说明，Xist基因的表达可能是导致小鼠孤雄单倍体胚胎质量差、干细胞建系率低的原因之一