青藤碱对 FLS增殖及α7nAChR、TLR2和TLR4表达的影响

摘要：目的 探讨青藤碱(sinomenine, SIN)对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)刺激的大鼠成纤维样滑膜细胞（fibroblast-like synoviocytes , FLS）增殖及α7烟碱型乙酰胆碱受体（α7 nicotinic acetylcholine receptors, α7nAChR）、Toll样受体2(toll-like receptor 2, TLR2)和Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)表达的影响。 方法 组织块法分离培养原代FLS，流式细胞术检测FLS表面标志物CD90。FLS设对照组、TNF-α组、SIN组（剂量分别为100，200，400μmol·L-1），SIN组给予SIN干预30min后，TNF-α组、SIN组均给予20ng·mL-1 TNF-α刺激24h，采用MTT法检测各组 FLS增殖，酶联免疫吸附（ELISA）法检测细胞上清白细胞介素-6（interleukin-6, IL-6)分泌量，RT-PCR检测α7nAChR、TLR2和TLR4 mRNA表达、Western bolt检测α7nAChR、TLR2和TLR4蛋白表达。 结果 TNF-α刺激FLS后，细胞明显增殖，分泌IL-6明显增加，α7nAChR、TLR2和TLR4 mRNA及蛋白表达增加，SIN（200，400μmol·L-1）能抑制FLS增殖，抑制IL-6分泌，并且下调α7nAChR、TLR2和TLR4 mRNA及蛋白表达。 结论 FLS增殖与α7nAChR、TLR2和TLR4表达相关，且SIN能抑制FLS增殖，并下调α7nAChR、TLR2和TLR4表达