甘精胰岛素注射液的临床前安全性评价

目的 通过Beagle犬长期毒性试验及其伴随的免疫原性试验，观察甘精胰岛素注射液的毒性反应，确定未观察到临床不良反应的剂量水平（NOAEL），为临床不良反应监测及防治提供参考。方法 健康Beagle犬40条，随机分为甘精胰岛素注射液低、中和高（0.5、1.0、2.0 IU/kg）剂量组、溶媒对照组及原研对照组（来得时，2.0 IU/kg），每组8只动物，雌雄各半。连续sc给药30天，停药恢复16天。试验期间进行一般体征观察、进食量、体质量、肛温、全血血糖及心电图检查；测定血液学常规与凝血指标、血清生化、尿液常规等指标；进行骨髓细胞形态学检查、大体剖检检查以及组织病理学检查。采用间接ELISA法检测不同时期动物血清抗药的结合抗体；采用体外生物活性HPLC法检测产生抗药抗体的阳性血清的中和活性。结果 在给药期的第8和10天，原研对照组和高剂量组各有1只雌性动物在给药后5～6 h出现抽搐和流涎等由低血糖所致的异常症状，其中高剂量组的该异常动物于次日死亡；给药期第11天的心电图检查发现高剂量组的T波倒置比例略高于溶媒对照组（5/7 vs 1/8），停药后恢复正常；其余存活动物的体质量、肛温、进食量、尿常规、血液学、血清生化和组织病理学等均未见毒理学意义的异常改变。免疫原性结果显示，仅有高剂量组1只雄性动物于给药期第12天产生抗药抗体，抗体滴度为1:16，阳性率为14.3%，产生结合抗体的血清样品经检测为非中和活性抗体。结论 在本试验条件下，Beagle犬sc重复给予甘精胰岛素注射液的NOAEL为1.0 IU/kg，该剂量相当于临床拟用剂量的2倍。该药在高剂量下可能对个别Beagle犬具有较弱的免疫原性