超滤法结合UPLC测定抗601合剂中黄芩苷、绿原酸在不同血浆中的蛋白结合率

目的 超滤法结合超高效液相色谱（UPLC）法同时检测抗601合剂中2种指标性成分――黄芩苷、绿原酸体外血浆蛋白结合率。方法 建立UPLC法同时测定牛血清白蛋白（BSA）、大鼠空白血浆和正常人空白血浆超滤液中的黄芩苷、绿原酸含量，进行专属性、精密度、准确度、稳定性、超滤膜回收率等方法学考察；配制黄芩苷质量浓度分别为28.2、141.0、282.0 mg/L，绿原酸质量浓度为6.40、32.0、64.0 mg/L的抗601合剂溶液，分别与BSA溶液、大鼠空白血浆、人空白血浆混匀后，置于37℃水浴温育4 h，于超滤离心管中10 000 r/min离心20 min，取超滤液10 μL注入UPLC分析测定，计算超滤液中黄芩苷和绿原酸浓度及血浆蛋白结合率。结果 建立的UPLC法专属性、精密度、准确度、稳定性、超滤膜回收率均良好，能够满足定量分析测试要求；黄芩苷与BSA、大鼠空白血浆和正常人空白血浆的蛋白结合率分别为（73.70±1.65）%、（82.72±1.64）%、（87.33±1.84）%，绿原酸与3种血浆的蛋白结合率分别为（66.78±1.91）%、（74.18±2.01）%、（78.54±2.97）%，无浓度相关性，两成分与BSA溶液蛋白结合率显著低于与大鼠空白血浆、人空白血浆结合率（P<0.05）。结论 抗601合剂中的黄芩苷、绿原酸与不同种属血浆均有较高的蛋白结合率，在考察范围内无浓度相关性，归类于中速处置类药物，体内消除情况与其血浆蛋白结合率可能密切相关