小檗碱对有机阴离子转运体抑制作用及双向跨膜转运研究

目的 研究小檗碱对有机阴离子转运体（OATs）的抑制作用及其双向跨膜转运情况。方法 应用由转染试剂Lipo 3 000介导的动物细胞转基因方法、经筛选得到人有机阴离子转运体OAT1、OAT2、OAT3、OAT4、OAT7和URAT1高表达单克隆细胞株；以野生型（WT）细胞为对照组，用各转运体放射性同位素标记底物和抑制剂验证其转运活性；观察100 μmol/L小檗碱对各转运体的抑制作用，并测定小檗碱对URAT1转运活性的半数抑制浓度（IC50）。通过Caco-2细胞模型研究小檗碱的双向跨膜转运情况。结果 100 μmol/L小檗碱使OAT1、OAT2、OAT3、OAT4、OAT7和URAT1相对转运活性分别下降至（70.48±4.23）%、（69.13±1.28）%、（72.12±3.28）%、（79.77±6.49）%、（69.51±5.99）%、（38.4±2.67）%；小檗碱对URAT1抑制作用的IC50为13.6 μmol/L；在50和100 μmol/L浓度下，小檗碱在顶侧（AP侧）-基底侧（BL侧）方向的跨膜渗透率Papp（A-B）分别为0.28×10-6 cm/s和0.40×10-6 cm/s，其相对应的外排率分别为3.18和3.15。结论 小檗碱对URAT1的抑制作用较强，对OAT1、OAT2、OAT3、OAT4、OAT7抑制作用相对较弱，小檗碱是一些外排蛋白的底物，为预测小檗碱可能发生的药物-药物相互作用、解释生物利用度低提供了理论依据