何首乌肝损伤模型大鼠胆汁淤积现象及相关蛋白表达研究

目的 观察经脂多糖（LPS）诱导后连续给予何首乌醇提液（AEP）7 d大鼠的肝损伤程度及胆汁淤积相关指标的变化。方法 将雄性SD大鼠随机分为5组：对照组、LPS组、LPS+对乙酰氨基酚（APAP）组、AEP组、LPS+AEP组，LPS、LPS+APAP、LPS+AEP组按大鼠体质量分别尾iv给予4 mg/kg LPS，对照组与AEP组给予等体积生理盐水；2 h后LPS+APAP组ig给予625 mg/kg APAP，AEP组与LPS+AEP组ig给予12 g/kg，每天1次，连续给药7 d，建立特异质肝损伤炎症模型。观察体质量变化，并分别于造模后2 h、14 h、5 d、8 d检测血清生化中肝功能相关指标的变化，同时收集胆汁，计算胆汁流速与密度，并检测胆汁中主要成分变化。进行肝脏系数及组织病理学检查，并对胆汁淤积相关蛋白胆盐输出泵转运蛋白（BSEP）、多药耐药蛋白2（MRP2）及多药耐药蛋白3（MRP3）进行Real-Time PCR检测。结果 经过LPS诱导2 d后，LPS+AEP组与对照组、AEP组比较体质量明显下降，5、8 d肝脏系数显著增加（P＜0.05）；血清生化指标分析结果显示，与对照组比较，LPS+AEP组丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）水平无明显变化；造模后8 d的总胆红素（TBIL）明显降低（P＜0.05），ALP明显升高（P＜0.05）；可观察到胆汁密度和胆汁流速明显降低（P＜0.05），对胆汁成分分析显示，与对照组比较，LPS+AEP组总胆固醇（TCHO）显著升高、TBIL显著降低（P＜0.05）；病理结果显示，AEP组出现轻微肝细胞变性，而LPS+AEP组可见严重局灶坏死；转录水平结果发现，LPS诱导后可使得BSEP、MRP2在14 h时出现短期抑制（P＜0.05），单独给予AEP可使BSEP、MRP2和MRP3的表达水平短时显著升高（P＜0.05、0.01），而LPS+AEP给药第8 d对大鼠肝脏BSEP、MRP2无显著性影响，可使MRP3转录水平升高（P＜0.05）。结论 经LPS诱导的AEP可明显损伤大鼠肝细胞并干扰胆汁分泌功能，引起胆汁成分相关生化指标的改变，对BSEP与MRP2水平无显著影响，MRP3出现代偿性升高，提示确实存在胆汁淤积症状，但可能是存在其他机制