低浓度TBBPA暴露促进子宫内膜癌细胞侵袭和迁移的毒性效应与机理

为了研究低浓度四溴双酚A （TBBPA）暴露对人子宫内膜癌恶化的影响，本实验采用人子宫内膜癌细胞Ishikawa暴露于不同浓度的TBBPA，探讨其毒性效应及可能存在的分子机理.实验采用MTT法检测Ishikawa细胞的存活率，用倒置显微镜观察TBBPA对Ishikawa细胞形态的影响，用细胞划痕与Transwell实验检测细胞迁移侵袭情况，用实时荧光定量PCR与Western blotting分别检测上皮间充质转化（Epithelial Mesenchymal Transition，EMT）标志物及相关转录因子mRNA与蛋白水平表达量.结果显示，Ishikawa细胞暴露于不同浓度TBBPA （1.00×10-9、1.00×10-8、1.00×10-7 mol·L-1）后，细胞存活率明显升高，细胞形态由卵圆形逐渐变为长梭形，细胞侵袭率、细胞划痕愈合率、细胞迁移率与对照组相比显著升高，差异具有统计学意义.在mRNA和蛋白水平上，EMT标志物E-cadherin表达量显著下降，Vimentin和N-cadherin表达量明显上升；EMT上游转录因子Twist和Snail-1的含量也显著增加.结果表明，TBBPA暴露是通过改变细胞内E-cadherin、Vimentin和N-cadherin的含量进而激活Ishikawa细胞上皮间充质转化，导致人子宫内膜癌的恶化；而激活上皮间充质转化的过程可能与TBBPA诱导Twist和Snail-1的表达有关