红鳍东方鲀FoxO1基因的原核表达及纯化

采集红鳍东方鲀脂肪组织提取其总RNA，采用RT–PCR方法扩增和克隆红鳍东方鲀FoxO1基因的ORF，并构建其原核表达载体pET–32/FoxO1，在大肠杆菌Rosetta (DE3)进行表达，通过IPTG诱导表达，对重组FoxO1蛋白进行可溶性分析、纯化及鉴定，结果表明：重组质粒pET32a/FoxO1被成功构建；用IPTG进行诱导表达，融合蛋白主要以可溶蛋白形式存在，能与抗His标签的兔多克隆抗体发生特异性反应；纯化出了融合表达蛋白，获得了相对分子质量约为110 000的重组蛋白