猪胰岛素诱导1基因的cDNA克隆和差异表达及蛋白质序列分析

克隆猪胰岛素诱导1(INSIG1)基因，并对其蛋白质序列进行分析。根据人INSIG1基因的保守序列设计1对引物，以猪总RNA为模板，经RT–PCR获得INSIG1基因序列，通过相对荧光定量PCR分析该基因在不同组织中的表达量；将INSIG1基因序列连接到pMD19–T Simple载体上，用PCR检测阳性克隆后测序，并对克隆得到的基因进行生物信息学分析。结果表明，INSIG1基因在肺中的表达量最高，其次是在肝脏，再次是在脾脏，在心脏中的表达量最低；通过克隆，获得了一段999 bp的序列，其中831 bp的开放阅读框编码276个氨基酸；该蛋白不含信号肽序列，与其他动物INSIG1基因氨基酸序列的一致性在71%以上