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湖南农业大学学报(自然科学版) 2016
去乙酰化酶SIRT1过表达对猪卵巢颗粒细胞中AMPK活性的影响Keywords: 猪 卵巢颗粒细胞 沉默信息调节因子1 (SIRT1) 腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK) Abstract: 构建猪SIRT1基因全长编码区(coding region sequence, CDS)的真核表达载体,转染猪原代卵巢颗粒细胞,探讨SIRT1基因过表达对猪卵巢颗粒细胞中AMPK基因的转录及其蛋白活性的影响。测序结果表明,猪SIRT1基因的CDS区全长大小为2 229 bp,与 NCBI 发布的猪SIRT1基因 mRNA序列(EU030283.2)一致;转染pEGFP–C1– SIRT1载体的颗粒细胞中SIRT1 的mRNA表达水平和蛋白表达水平极显著高于空载体对照组(P<0.01);pEGFP–C1–SIRT1转染组细胞中,AMPK–α1和AMPK–α2基因的 mRNA 表达量显著高于空载体对照组,且细胞中AMPKα Thr172位点的磷酸化水平显著升高(P<0.05)。结果表明,体外培养的原代猪卵巢颗粒细胞中的SIRT1基因过表达使AMPK的表达显著增加,影响AMPK的活性,推测SIRT1可能通过AMPK在猪卵巢颗粒细胞凋亡过程中发挥重要的调控作用
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