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湖南农业大学学报(自然科学版) 2016
云杉叶疫病根球壳孢菌的分子检测Keywords: 云杉叶疫病 根球壳孢菌 分子检测 Abstract: 从四川二郎山人工云杉林分离得到云杉叶疫病病原菌，采用真菌通用引物ITS1和ITS4扩增得到的序列与NCBI中的根球壳孢菌(Rhizosphaera kalkhoffi)相似度达99%。比较分析了NCBI及四川二郎山分离到的根球壳孢菌ITS区序列，采用软件primer5.0设计20个引物。通过对32株菌株DNA进行PCR扩增及产物测序，筛选得到3个特异性引物对ZYZ6、ZYZ7、ZYZ8。改变DNA模板浓度进行扩增检测，在25 μL PCR反应体系中，引物对ZYZ6F/ZYZ6R检测灵敏度最高，可达到0.1 pg/μL。利用ZYZ6F/ZYZ6R对四川二郎山人工云杉针叶DNA进行检测，扩增得到310 bp左右的条带，测序结果与GenBank中根球壳孢菌相似度达99%
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