水稻干尖线虫翻译控制肿瘤蛋白基因的克隆及表达分析

根据转录组测序结果，结合RT–PCR及RACE技术，从水稻干尖线虫中克隆出翻译控制肿瘤蛋白(The translationally controlled tumor protein，TCTP)基因Ab–TCTP。该基因序列全长810 bp，开放阅读框长度为546 bp，编码181个氨基酸，预测蛋白相对分子质量为20 930，等电点为4.68；Ab–TCTP蛋白属于稳定性蛋白，没有信号肽和跨膜区域，亚细胞定位于细胞核中；该蛋白功能区域的氨基酸序列较为保守，含有TCTP保守结构域，属于TCTP超家族(TCTP superfamily)。多序列比对分析结果表明，Ab–TCTP蛋白与秀丽隐杆线虫TCTP蛋白(XP_003112086.1)的覆盖度为100%，相似度为78%。系统进化树分析结果表明，该蛋白与秀丽隐杆线虫TCTP蛋白(XP_003112086.1)在同一分支上，亲缘关系较近。原位杂交试验结果显示，杂交处理后的线虫在其食道腺附近颜色加深，TCTP基因主要在水稻干尖线虫的食道腺附近表达。利用鱼藤酮对水稻干尖线虫进行药剂处理试验，24 h时LC50值为2.20 μg/mL。实时荧光定量PCR结果显示，鱼藤酮处理12 h和24 h后，TCTP基因的表达均上调，且处理24 h时的表达量大于处理12 h时的表达量。推测该基因参与了水稻干尖线虫的应激反应