Intermedin对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注炎性细胞因子的影响

目的　观察Intermedin对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注后炎性细胞因子的影响，从而进一步探讨Intermedin对糖尿病心肌缺血再灌注损伤保护作用的机制。方法　健康雄性SD大鼠74只，给予适应性饲养一周后，将74只雄性SD大鼠随机分为糖尿病组（50只）和非糖尿病组（24只）。非糖尿病组给予枸橼酸缓冲液腹腔注射，糖尿病组建立糖尿病大鼠模型，通过腹腔注射链脲佐菌素复制I型糖尿病大鼠模型。然后阻断大鼠冠状动脉左前降支30　min制备心肌缺血再灌注损伤模型。将成功造模的大鼠随机分为5个实验组：对照组（NS）、缺血再灌注组（NIR）、糖尿病组（DS）、糖尿病缺血再灌注组（DIR）和应用Intermedin干预的治疗组（IMD）。应用ELISA法测定血清中炎性细胞因子TNF-α、IL-6和IL-1β的含量。应用RT-PCR法检测心肌组织中TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA的表达。免疫组织化学S-P法和Western-blot检测心肌组织NF-κB的表达。结果　与各自对照组和糖尿病组比较，NIR组与DIR组大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-1β含量升高（P<0.05）。但是同DIR组比较，IMD组大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-1β含量则明显降低。（P<0.05）。NIR组和DIR组大鼠心肌组织中TNF-α、IL-6、IL-1β　mRNA表达与各自对照组和糖尿病组比较均明显增强（P<0.05）。IMD组TNF-α、IL-6、IL-1β　mRNA表达比DIR组明显减弱（P<0.05）。免疫组织化学结果显示，当心肌缺血再灌注后其心肌组织中可观察到核移位的现象，即在NIR组和DIR组中NF-κB活化增强，阳性颗粒出现在胞浆和胞核。而在对照组和糖尿病组大鼠心肌组织中观察到NF-κB呈低表达状态，并且阳性表达出现在胞浆中。同DIR组相比较，IMD组NF-κB的表达活性将低，阳性表达的细胞数明显减少（P<0.05）。Western　blot结果显示：分别与对照组和糖尿病组相比较，NIR组和DIR组NF-κB表达量均显著增加（P<0.05），而IMD组NF-κB表达显著低于DIR组（P<0.05）。结论　Intermedin对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注具有保护作用，其部分保护作用机制可能与intermedin可以抑制NF-κB活化，从而减少炎性因子如TNF-α、IL-1β和IL-6的表达，减轻炎症反应有关