利用CRISPR/Cas9技术制备ApoE－/－兔

目的 制作载脂蛋白E(ApoE)基因敲除(ApoE－/－)兔,为研究动脉粥样硬化提供优良动物模型。方法应用CRISPR/Cas9系统编辑新西兰兔的ApoE基因,制作F0代ApoE－/－兔,利用PCR、TA克隆、Sanger测序、Western blot和血脂检测鉴定ApoE靶向敲除的效率和效果,并通过传代获得ApoE＋/－兔。结果 Sanger测序结果显示成功靶向敲除兔ApoE基因,血清脂蛋白含量在正常饮食状态下相对于野生型兔有升高,且可稳定遗传。结论 成功建立了ApoE－/－兔,为进一步研究动脉粥样硬化和其他相关疾病提供了良好的动物模型