microRNA-124-2在CD137-CD137L信号通路调控小鼠血管平滑肌细胞活化T细胞核因子C1表达中的作用

目的 探讨microRNA-124-2在CD137-CD137L信号通路调控小鼠血管平滑肌细胞(VSMC)活化T细胞核因子C1(NFATc1)表达中的作用。方法 小鼠血管平滑肌细胞采用组织贴块法原代培养,细胞中microRNA-124-2表达采用RT-PCR法检测；应用脂质体转染技术将microRNA-124-2的模拟物(mimic)和抑制物(inhibitor)转染至小鼠VSMC内,细胞中NFATc1 mRNA及蛋白表达采用实时荧光定量PCR及Western blot方法检测；应用双荧光素酶报告检测microRNA-124-2对NFATc1-3′UTR的作用。结果 anti-CD137特异性刺激CD137-CD137L轴后,平滑肌细胞microRNA-124-2表达较对照组降低(0.29±0.13比1.00±0.00,P<0.05),而anti-CD137L特异性阻断CD137-CD137L轴后,细胞中microRNA-124-2表达较对照组增加(3.42±0.17比1.00±0.00,P<0.05)；与阴性对照组相比,升高或下调microRNA-124-2的表达均可逆转CD137-CD137L轴对NFATc1的作用；双荧光素酶报告系统显示microRNA-124-2对NFATc1-3′UTR有抑制作用(0.283±0.011比1.294±0.143,P<0.001)。结论 CD137-CD137L受体-配体轴可以通过调控microRNA-124-2进而影响NFATc1的表达