柴竭抑肝纤对大鼠肝星状细胞增殖和TGF-β1/Smad信号通路的影响

目的：研究保肝护肝中药复方柴竭抑肝纤（CJYGX）通过肝星状细胞治疗肝纤维化的作用机制。方法：培养肝星状细胞T6（hepatic stellate cell T6，HSC-T6），设空白组、秋水仙碱1.0 mg·L-1组和200，100，50，25，12.5，6.25 mg·L-1质量CJYGX组，作用24 h后通过细胞计数试剂（cell counting kit-8，CCK-8）检测HSC-T6细胞的增殖情况，筛选合适的CJYGX药物浓度；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测CJYGX（200，100，50 mg·L-1）作用HSC-T6细胞24 h后转化生长因子-β1（TGF-β1），信号转导蛋白Smad2，Smad3，Smad4，Smad7 mRNA表达变化；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测CJYGX（200，100，50 mg·L-1）作用HSC-T6细胞24 h后TGF-β1，α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达变化。结果：①与空白组比较，200，100，50 mg·L-1CJYGX对HSC-T6细胞具有显著的抑制增殖作用（P<0.05）。②200，100，50 mg·L-1CJYGX显著下调TGF-β1，Smad2，Smad3 mRNA的表达（P<0.05）；200，100 mg·L-1CJYGX显著下调Smad4 mRNA表达，并显著上调Smad7 mRNA表达（P<0.05）。③ 200，100 mg·L-1CJYGX显著下调HSC-T6细胞TGF-β1和α-SMA蛋白表达（P<0.05）。结论：CJYGX能抑制HSC-T6细胞的增殖，其作用机制与TGF-β1/Smad通路有关