扶正化瘀方对原代大鼠肝细胞中CYP450的影响

目的：采用原代大鼠肝细胞（PRH）研究扶正化瘀方（FZHY）对大鼠细胞色素P450酶（CYP450）的影响。方法：采用两步灌流法分离大鼠原代肝细胞，形成肝板结构后加入FZHY共培养24 h，换成含有4种CYP450同工酶（CYP1A2，CYP2C9，CYP2D6，CYP3A4）对应的特异性探针药物（非那西丁、甲苯磺丁脲、氢溴酸右美沙芬、睾酮）的培养基，培养2 h后吸取上清液，利用UPLC-MS/MS对探针药物的代谢产物进行检测，考察FZHY对探针药物代谢产物生成量的影响，评价FZHY对PRH中CYP450代谢活力的影响。结果：PRH中CYP1A2，CYP2C9，CYP2D6与CYP3A4具有良好的代谢活力。4种探针药物在0~500 μmol·L-1内对PRH没有毒性，在0.5~500 μg·L-1时，FZHY对PRH没有毒性。FZHY在5 μg·L-1时对PRH具有轻微的保护作用，并能使甲苯磺丁脲的代谢活化值——米氏常数（Km）降低20.8%；氢溴酸右美沙芬的Km降低39.2%；非那西丁的Km降低17.4%；并使睾酮的Km显著降低。结论：FZHY能抑制原代大鼠肝细胞中CYP1A2，CYP2C9，CYP2D6和CYP3A4的代谢活性