多重位点特异性PCR鉴别海龙及其混伪品

目的：建立一种高效、准确的中药材海龙及其常见混伪品的特异性聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）鉴别方法。方法：通过比较海龙及其混伪品的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ基因（cytochrome C oxidase subunit Ⅰ，COⅠ）基因序列差异，根据变异位点设计刁海龙、尖海龙及拟海龙的特异性鉴别引物，优化反应体系，并对此方法进行耐受性和适用性的考察和验证。在此基础上，将3对特异性引物组合，构建多重PCR体系。结果：在多重PCR体系中，刁海龙能扩增出485 bp片段，尖海龙可扩增出120 bp片段，拟海龙可以扩增出240 bp片段，其他混伪品均条带。所设计的特异性鉴别引物具有高度的特异性。结论：该文所建立的位点特异性PCR鉴别方法可实现海龙的准确鉴别