糖痹康对高糖培养雪旺细胞自噬相关蛋白的影响

目的：研究发现细胞自噬是糖尿病周围神经病变（diabetic peripheral neuropathy，DPN）的重要发病机制之一，本研究探讨治疗DPN的中药复方糖痹康（Tangbikang，TBK）对高糖环境下大鼠雪旺细胞（rat Schwann cells，RSC）自噬相关蛋白的影响。方法：利用SD大鼠制备TBK含药血清，并采用50 mmol·L-1的葡糖糖（Glu）RSC细胞培养基制备高糖RSC细胞模型。实验总共分为6组：正常组（Con，20%正常大鼠血清），高糖组（Glu，50 mmol·L-1 Glu+20%正常大鼠血清）；弥可保组（MKB，50 mmol·L-1 Glu+20%弥可保含药血清）；TBK高剂量组（TBKH，50 mmol·L-1 Glu+20% TBK含药血清）；TBK中剂量组（TBKM，50 mmol·L-1 Glu+10% TBK含药血清+10%正常大鼠血清）；TBK低剂量组（TBKL，50 mmol·L-1 Glu+2.5% TBK含药血清+17.5%正常大鼠血清）。干预48 h后，采用细胞增殖实验细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测RSC细胞增殖活性，流式细胞术检测细胞凋亡率，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测自噬蛋白（Beclin 1）和微管相关蛋白1轻链3Ⅱ（LC3 Ⅱ）的表达水平。结果：与Con组比较，高糖因素使得Glu组RSC增殖活性显著降低（P<0.01），细胞凋亡率显著增加（P<0.01），且自噬相关标志蛋白Beclin 1和LC3 Ⅱ显著下降（P<0.01）；与Glu组比较，MKB组与TBKH组RSC细胞增殖显著减弱（P<0.01），MKB组，TBKH和TBKM组RSC细胞凋亡率显著减小（P<0.01），MKB组和TBKH组RSC细胞自噬标志蛋白Beclin 1和LC3 Ⅱ的表达水平显著升高（P<0.01）。结论：TBK能够促进高糖环境下RSC细胞自噬，减少凋亡，具有一定的神经保护作用，该研究为DPN新药研发奠定基础