消癌解毒方诱导人肝癌SMMC-7721细胞miRNA表达变化

目的：探讨消癌解毒方对人肝癌SMMC-7721细胞增殖及微小核糖核酸（microRNA，miR）-25-3p，miR-29a-5p，miR-122-3p，miR-124-3p，miR-182-5p表达谱的影响。方法：将12只雄性大耳白兔随机分为4组，分别为消癌解毒方高、中、低剂量（15.12，7.56，3.78 g ·kg-1）组和空白组，各组分别给予消癌解毒方及生理盐水灌胃4 d。4 d后于颈动脉中取血清并配制培养基。用消癌解毒方（15.12，7.56，3.78 g ·kg-1）含药血清及空白血清的培养基处理人肝癌细胞株SMMC-7721，噻唑蓝（MTT）比色法检测肿瘤细胞增殖活性、实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应（Real-time polymerase chain reaction，Real-time PCR）法验证人肝癌细胞SMMC-7721中miR-25-3p，miR-29a-5p，miR-122-3p，miR-124-3p和miR-182-5p的表达水平。结果：经过12，24，48 h后，消癌解毒方（15.12，7.56，3.78 g ·kg-1）含药血清对人肝癌SMMC-7721细胞的增殖均存在抑制作用。随着消癌解毒方含药血清浓度的增加，其对人肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖的抑制率也相应增加。其中高剂量组含药血清的抑制效果最好，其干预12，48 h的吸光度A较同期空白组明显降低（P<0.05）。高剂量组干预24 h A比同期空白组显著降低（P<0.01），该组抑制率为42.86%。Real-time PCR证实消癌解毒方（15.12，7.56，3.78 g ·kg-1）含药血清的培养基能诱导miR-25-3p，miR-182-5p表达下调，诱导miR-29a-5p，miR-122-3p，miR-124-3p表达上调。且高剂量组的调控作用较空白组更显著（P<0.01）。结论：消癌解毒方可能通过诱导miRNA表达谱的改变而参与抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖作用，但其具体机制仍有待进一步研究