艳山姜挥发油对TGF-β1诱导人脐静脉内皮细胞间质转分化的保护作用

目的：研究艳山姜挥发油（EOFAZ）对转化生长因子-β1（TGF-β1）诱导人脐静脉内皮细胞（HUVECs）间质转分化的干预保护作用。方法：采用TGF-β1（10 μg ·L-1，孵育48 h）诱导建立内皮-间质转化（EndMT）细胞模型。实验分组为正常组，模型组（10 μg ·L-1 TGF-β1），EOFAZ高剂量组（10 μg ·L-1 TGF-β1+4 μg ·L-1 EOFAZ）及EOFAZ低剂量组（10 μg ·L-1 TGF-β1+2 μg ·L-1 EOFAZ）。EOFAZ于造模前干预给药2 h，加入TGF-β1共孵育复制EndMT细胞模型。倒置显微镜下观察细胞形态，划痕实验分析细胞迁移能力，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测EOFAZ对内皮细胞特异性标志物血管内皮细胞钙粘素（VE-cadherin），间充质细胞特异性标志物α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA），锌指转录因子（Snail）及核转录因子-κB（NF-κB）p-p65蛋白表达的影响。结果：TGF-β1诱导孵育后，细胞形态多呈长梭形，并可见明显的细胞丝状伪足，细胞间的紧密连接减少；划痕实验结果表明模型组细胞迁移能力增强（P<0.01）；VE-cadherin蛋白表达显著减少（P<0.01），α-SMA，Snail，NF-κB p-p65蛋白表达量明显增多（P<0.01）。EOFAZ高、低剂量组干预给药后，能够明显抑制TGF-β1诱导的细胞迁移能力（P<0.01），同时能增加VE-cadherin的表达，降低α-SMA，Snail及NF-κB p-p65蛋白的表达。结论：艳山姜挥发油对TGF-β1诱导的HUVECs间质转分化具有干预保护作用，其机制与抑制NF-κB p65的磷酸化激活有关