两色金鸡菊提取物对大鼠肾小球系膜细胞增殖及纤维化因子表达的影响

目的：本研究通过高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞建立糖尿病肾病的体外模型，观察两色金鸡菊乙酸乙酯提取物（ethyl acetate extract of Coreopsis tinctoria，AC）对模型中细胞增殖及纤维化因子表达的影响。方法：采用AC对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞进行干预，将细胞分为正常组，模组组，AC不同质量浓度（25，50，100，150 mg · L-1）组。采用噻唑蓝（MTT）比色法，细胞增殖与活性检测（CCK8）法检测AC不同质量浓度对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖的抑制作用；采用实时荧光定量PCR（Real-time PCR），蛋白免疫印迹法（Western blot）进一步观察AC不同质量浓度对肾脏纤维化蛋白转化生长因子-β1（TGF-β1），胶原蛋白Ⅳ（CollagenⅣ），纤维连接蛋白（FN）表达的影响。结果： AC 50，100，150 mg · L-1组均能抑制高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞的增殖（P<0.01）；AC 25，100，150 mg · L-1质量浓度组显著降低细胞中TGF-β1的mRNA与蛋白表达水平（P<0.01）；AC 100，150 mg · L-1质量浓度组显著抑制细胞中CollagenⅣ mRNA与蛋白的表达水平（P<0.01）；AC 50，100，150 mg · L-1质量浓度组显著抑制细胞中FN mRNA与蛋白的表达水平（P<0.01）。结论：两色金鸡菊乙酸乙酯提取物可能通过抑制大鼠肾小球系膜细胞增殖及纤维化因子表达发挥其对糖尿病肾病肾脏保护作用