益气养阴活血通络法干预肺成纤维细胞TGF-β1/Smads信号传导通路的机制

目的：探讨益气养阴活血通络法调控肺成纤维细胞转化生长因子-β1（TGF-β1）/Smads信号传导通路机制。方法：SPF级雄性Wistar大鼠30只，采用随机数字法，将30只大鼠随机分为3组，中药含药血清组，西药含药血清组，正常血清组，第4天末次给药后提取含药血清。气管内注入博来霉素造肺纤维化大鼠动物模型，采用胰蛋白酶消化液消化法培养肺成纤维细胞。细胞分为模型组，中药组，西药组，抑制剂组。免疫荧光法鉴定肺成纤维细胞，并分别于第24，48，72 h取材，采用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测TGF-β1，Smad2，Smad4，Smad7 mRNA的表达及流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果：第24，48，72 h检测结果显示，与模型组比较，中药组、西药组、抑制剂组细胞内TGF-β1 ，Smad2，Smad4 mRNA表达水平明显下调（P<0.01）；第24 h西药组TGF-β1 mRNA表达水平明显低于中药组（P<0.05）；第48，72 h检测结果均显示与中药组比较，西药组、抑制剂组TGF-β1 mRNA表达水平均明显下调（P<0.05，P<0.01）；第24，48 h检测结果显示与模型组比较，中药、西药、抑制剂各组细胞内Smad2 mRNA表达水平下调明显（P<0.01）；中药组、西药组、抑制剂组3者表达水平相近，统计学意义。第72 h检测结果显示与中药组比较，西药组、抑制剂组Smad2 mRNA表达水平均明显下调（P<0.05）；第24，48，72 h检测结果均显示与中药组比较，西药组、抑制剂组Smad7 mRNA表达水平均明显下调（P<0.01）。第24，48，72 h检测结果均显示与模型组比较，中药组、西药组与抑制剂组凋亡率明显上调（P<0.01）；中药组细胞凋亡率明显高于抑制剂组（P<0.01）。结论：益气养阴活血通络法可能通过下调肺成纤维细胞TGF-β1，Smad2，Smad4含量和上调Smad7含量调控TGF-β1/Smads信号通路，从而延缓特发性肺纤维化（IPF）进展