翻白草含药血清对高糖培养肾小管上皮细胞增殖作用及其对RhoA/ROCK信号通路的影响

目的：探讨翻白草含药血清对高糖培养小鼠肾小管上皮细胞增殖及其对转分化机制的影响。方法：制备各组大鼠含药血清；10%胎牛血清（FBS）-RPMI 1640培养基培养小鼠肾小管上皮细胞，传代培养后按3 000个/孔接种于96孔培养板，分为正常组、高糖组、厄贝沙坦组及翻白草组；加入相对应6%含药血清的高糖RPMI 1640培养基；培养12，24，48，60 h时分别观察各组细胞形态，并应用噻唑蓝（MTT）比色法检测各组吸光度A；高糖培养24 h后应用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组肾小管上皮细胞小G蛋白（RhoA），Rho蛋白激酶1（ROCK1），α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和钙黏附蛋白-E（E-cadherin）蛋白表达情况。结果：高糖培养后肾小管上皮细胞由扁平不规则的多角形变为长梭形；加入相应含药血清干预后细胞呈扁平不规则的多角形；与正常组比较，12 h时高糖组肾小管上皮细胞呈明显增殖状态（P<0.05），24，48，60 h时增殖显著（P<0.01）；与高糖组比较，12 h时翻白草组能抑制肾小管上皮细胞增殖（P<0.05），24，48，60 h时翻白草组抑制肾小管上皮细胞增殖作用显著增强（P<0.01）；与厄贝沙坦组比较，48，60 h翻白草组能抑制肾小管上皮细胞增殖（P<0.05）；与模型组比较，翻白草组E-cadherin蛋白表达显著增加，RhoA，ROCK1和α-SMA蛋白表达显著减少（P<0.01）。结论：翻白草含药血清可以抑制高糖培养的肾小管上皮细胞增殖、抑制肾小管上皮细胞转分化，可能与RhoA/ROCK信号通路有关