岩大戟内酯B刺激MCF-7细胞条件培养基降低人脐静脉血管内皮细胞的增殖和迁移

目的：观察岩大戟内酯B（jolkinolide B，JB）刺激MCF-7条件培养基对人脐静脉血管内皮细胞的影响，并分析岩大戟内酯B的作用机制。方法：分别用25，55，85 mg ·L-1岩大戟内酯B刺激MCF-7人乳腺癌细胞为JB刺激组，正常培养的MCF-7细胞为MCF-7组。获得25，55，85 mg ·L-1 JB刺激的MCF-7细胞上清液为相应浓度的条件培养基。利用各组条件培养基分别培养人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）为25，55，85 mg ·L-1 JB组，正常培养的HUVEC为非条件培养基组。分别用噻唑蓝（MTT）比色法，Annexin V-FITC细胞凋亡实验，细胞划痕实验和transwell细胞小室迁移实验观察25，55，85 mg ·L-1 JB组HUVEC增殖、凋亡、迁移的变化；并利用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测JB对MCF-7细胞的作用机制，酶联免疫吸附试验（ELISA）分析各组条件培养基中血管内皮细胞生长因子（VEGF）的含量变化。结果：与正常组比较，25，55，85 mg ·L-1 JB组HUVEC细胞凋亡数目逐渐升高（P<0.01），HUVEC增殖显著降低（P<0.01）；25，55，85 mg ·L-1 JB组HUVEC细胞划痕面积闭合率和细胞迁移率较非条件培养基组均显著降低（P<0.01）。与MCF-7比较，25，55，85 mg ·L-1 JB均能够明显抑制MSC-7细胞蛋白激酶B/信号传导及转录激活因子3/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（Akt/STAT3/mTOR）信号通路表达，下调MCF-7细胞表达的VEGF因子。结论：岩大戟内酯B通过抑制Akt/STAT3/mTOR信号通路下调MCF-7细胞旁分泌VEGF，抑制血管内皮细胞的增殖或迁移活性