南蛇藤提取物通过Cofilin1抑制胃癌BGC-823细胞转移的机制

目的：探讨南蛇藤乙酸乙酯提取物（Celastrus orbiculatus extract，COE）抑制胃癌侵袭转移的作用及其机制。为胃癌的中医药预防与治疗寻求新的靶点，为开发有效的抗胃癌中药奠定理论和实验基础。方法：利用前期蛋白质二维电泳技术，在胃癌中筛选出COE作用于胃癌的差异大的靶点蛋白。然后利用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测COE（20，40，80 mg·L-1）干预后细胞中丝切蛋白1（Cofilin 1，CFL1）水平的表达情况。最后利用分子克隆技术，将胃癌细胞株BGC-823中的CFL1表达抑制，然后联合COE进行干预，检测COE是否能影响胃癌细胞的侵袭转移。结果：在前期实验基础上经过细胞水平的验证，CFL1能够在胃癌细胞中稳定高表达；Western blot结果显示，COE能抑制胃癌细胞中CFL1的表达，经不同质量浓度COE（20，40，80 mg·L-1）处理24 h的BGC-823细胞，其CFL1的水平受到了不同程度的抑制。随着COE的浓度递增，CFL1的表达逐渐减弱。与空白组比较，COE40，80 mg·L-1组CFL1表达显著减少（P<0.01）；利用小干扰RNA（siRNA）技术干扰胃癌BGC-823细胞株后，CFL1表达受到明显抑制，与空白组比较，siRNA-CFL1慢病毒转染组BGC-823细胞中CFL1受到显著抑制（P<0.01）；细胞侵袭实验（transwell）显示COE能显著减少胃癌BGC-823细胞敲低表达后细胞的透膜细胞数（P<0.01）。结论：COE能明显抑制胃癌BGC-823细胞的转移，其机制可能与抑制CFL1的过度表达有关