华蟾素通过调控基质金属蛋白酶抑制人胃腺癌细胞MGC-803侵袭与迁移

目的：探讨华蟾素对人胃腺癌MGC-803细胞的侵袭与迁移的影响及其分子机制。方法：噻唑蓝（MTT）比色法检测华蟾素（10，20，40，80，160，320 mg·L-1）对人胃腺癌MGC-803细胞增殖的抑制影响；transwell小室法检测华蟾素对MGC-803细胞侵袭与迁移能力的影响；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测经华蟾素作用后的MGC-803细胞中基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinases-2，MMP-2），基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinases-9，MMP-9）和基质金属蛋白酶抑制因子-1（tissue inhibitors of metalloproteinases-1，TIMP-1），基质金属蛋白酶抑制因子-2（tissue inhibitors of metalloproteinases-2，TIMP-2）的蛋白表达水平；实时荧光定量PCR（Real-time PCR）检测经华蟾素处理后的MGC-803细胞中MMP-2，MMP-9，TIMP-1，TIMP-2的mRNA表达情况。结果：①MTT比色法结果显示，与空白组比较，华蟾素（10，20，40，80，160，320 mg·L-1）对胃腺癌MGC-803细胞的增殖具有显著抑制作用（P<0.01），并且华蟾素对MGC-803细胞的抑制作用呈浓度和时间依赖。②transwell实验结果显示，与空白组比较，华蟾素（10，20，40 mg·L-1）对胃腺癌MGC-803细胞的侵袭与迁移能力具有不同程度的抑制作用（P<0.05）③Real-time PCR和Western blot实验结果显示，与空白组比较，华蟾素（10，20，40 mg·L-1）能够下调MMP-2，MMP-9蛋白和mRNA的表达，上调TIMP-1，TIMP-2蛋白和mRNA的表达。结论：华蟾素能明显抑制胃腺癌MGC-803细胞的侵袭与迁移，其机制可能与上调TIMP-1，TIMP-2的转录水平，进而下调MMP-2，MMP-9蛋白水平有关