葛根总黄酮对氧化应激损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用及其机制

目的：研究葛根总黄酮对H2O2诱导人脐静脉内皮细胞（HUVECs）氧化应激损伤的影响，并探讨其相关的作用机制。方法：以HUVECs为研究对象，实验分为空白组、模型组、阳性药组（10 μmol·L-1依达拉奉）和葛根总黄酮10，20，40，80，160 mg·L-1组；采用噻唑蓝（MTT）比色法检测葛根总黄酮对HUVECs的保护作用，采用分光光度法测定细胞培养上清液中细胞内超氧化物歧化酶（SOD），丙二醛（MDA）及NO含量；酶联免疫吸附测定（ELISA）检测细胞上清液中内皮素-1（ET-1）含量；采用二氯荧光乙酰乙酸盐（DCFH-DA）法检测活性氧（ROS）水平；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测内皮型一氧化氮合酶（eNOS）和血管细胞黏附分子-1（VCAM-1）的表达。结果：与正常组比较，模型组细胞存活率显著降低（P<0.01），SOD活性，NO水平和eNOS蛋白表达显著降低（P<0.01），MDA，ET-1水平，细胞ROS水平和VCAM-1蛋白表达显著升高（P<0.01）；与模型组比较，葛根总黄酮（40，80，160 mg·L-1）可以显著提高氧化应激损伤的HUVECs的存活率（P<0.05，P<0.01），葛根总黄酮（20，40，80 mg·L-1）可显著增加SOD活性，升高NO水平，显著降低MDA，ET-1水平，显著降低细胞ROS水平，显著升高eNOS，降低VCAM-1的表达（P<0.05，P<0.01）。结论：葛根总黄酮对H2O2诱导HUVECs氧化应激损伤有保护作用，其作用机制可能与调节SOD，MDA，ET-1，NO氧化应激相关因子，调控内皮细胞功能相关蛋白eNOS，VCAM-1的表达有关