橄榄苦苷对胰岛素抵抗HepG2肝细胞胰岛素信号传导的影响

目的：观察橄榄苦苷（oleuropein，OL）对胰岛素抵抗HepG2肝细胞的胰岛素信号传导的影响。方法：常规复苏细胞，于10% FBS+1%青-链霉素的DMEM （1 g·L-1葡萄糖）培养基中，37℃ 5% CO2细胞培养箱中培养，常规细胞培养传至第3代待用；利用1×10-6mol·L-1胰岛素溶液刺激HepG2肝细胞36 h后建立肝细胞胰岛素抵抗模型，分为模型组，OL组（50 μmol·L-1），另设正常HepG2肝细胞为正常组，每组设6个复孔；对数生长期细胞，饥饿培养24 h后，诱导建立胰岛素抵抗模型，进行药物干预36 h后，以细胞计数试剂盒-8（CCK-8）检测OL对细胞活性的影响；OL对胰岛素抵抗HepG2肝细胞干预后，实时荧光定量PCR （Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Western blot）分别检测肝细胞胰岛素受体（InsR），胰岛素受体底物-1（IRS-1），葡萄糖转运蛋白-2（GLUT-2） mRNA和蛋白表达水平。结果：与正常组比较，模型组胰岛素抵抗的HepG2肝细胞活性明显降低（P<0.05），胰岛素信号分子InsR，IRS-1，GLUT-2 mRNA和蛋白表达明显降低（P<0.05，P<0.01）。与模型组比较，OL干预后胰岛素抵抗的HepG2肝细胞活性显著升高（P<0.01）；胰岛素信号分子InsR，IRS-1，GLUT-2 mRNA和蛋白表达明显升高（P<0.05，P<0.01）。结论：OL能够增加胰岛素抵抗肝细胞活性，上调肝细胞胰岛素信号通路中InsR，IRS-1，GLUT-2 mRNA和蛋白的表达，这可能是其改善胰岛素抵抗的机制之一