白桦脂醇通过ER/MAPK信号通路对A375细胞黑素合成及机制

目的：研究植物雌激素成分白桦脂醇及加入受体阻断剂（ICI182780）后对A375细胞的黑素合成及机制的影响。方法：将1 μmol·L-1白桦脂醇作用于A375黑素细胞，实验分为空白组（DMEM完全培养液），雌二醇组（1×10-3μmol·L-1），白桦脂醇组（1 μmol·L-1），白桦脂醇+ICI182780组（1 μmol·L-1+1 μmol·L-1）。用NaOH裂解法检测黑素含量、蛋白免疫印迹法（Western blot）和实时荧光定量PCR法（Real-time PCR）测定雌激素受体/丝裂原激活的蛋白激酶（ER/MAPK）通路中关键蛋白激酶p38 MAPK，ERβ，c-Jun氨基末端激酶（JNK），细胞外信号调节激酶2（ERK2）和小眼畸形相关转录因子（MITF），酪氨酸酶（TYR），酪氨酸酶相关蛋白-1（TRP-1），酪氨酸酶相关蛋白-2（TRP-2）的蛋白及其mRNA表达。结果：与空白组比较，白桦脂醇组和白桦脂醇+ICI182780组对A375细胞黑素合成有显著抑制作用（P<0.01）；1 μmol·L-1的白桦脂醇对A375细胞中上述蛋白表达有不同程度的抑制作用（P<0.05，P<0.01），对ERK2，MITF，TRP-1 mRNA的表达也有不同程度的抑制作用（P<0.05，P<0.01）。与白桦脂醇组比较，ICI182780可以逆转白桦脂醇对A375细胞黑素合成的抑制作用（P<0.01）；ICI182780可以逆转白桦脂醇对A375细胞中上述蛋白表达的抑制作用及对ERK2，MITF，TRP-1 mRNA的表达的抑制作用（P<0.05，P<0.01）。结论：白桦脂醇能够通过ER/MAPK信号通路下调MITF，TYR，TRP-1及TRP-2蛋白表达量，从而减少黑素合成