参苓白术散协同奥沙利铂对人结肠癌细胞增殖及凋亡的作用

目的：探讨参苓白术散（Shenling Baizhu San，SBS）对人结肠癌HCT116细胞增殖及凋亡的影响。方法：以化疗药奥沙利铂（oxaliplatin，L-OHP）为阳性药，采用噻唑蓝[3-（4，5-dimethyl-2-thiazolyl）-2，5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide，MTT]比色法检测SBS联用L-OHP前后对HCT116细胞生长的抑制情况，碘化丙啶（PI）染色分析细胞周期分布，Annexin V-FITC试剂盒检测HCT116细胞凋亡，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测其对细胞内B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2，Bcl-2），Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白的影响。结果： ① MTT比色法结果显示，分别取0.002，0.004，0.008，0.016，0.032，0.064，0.128 g·L-1 L-OHP联用5% SBS药物血清作用于HCT116细胞48 h，与联用前各组比较，联用后各组细胞抑制率均明显上升（P<0.05），其中以0.064 g·L-1L-OHP联用5% SBS最高，达（94.95±0.90）%；②周期结果显示，与联用前L-OHP （0.002，0.004，0.008 g·L-1）组比较，分别联用5% SBS后，G2/M期HCT116细胞分布增多，均由G0/G1，S和G2/M期转至G2/M期，以L-OHP 0.008 g·L-1联用5% SBS组最为明显（P<0.05）；③凋亡结果显示，与联用前L-OHP （0.002，0.004，0.008 g·L-1）组比较，分别联用5% SBS后均能明显增加HCT116细胞凋亡率（P<0.05），以高剂量联用组凋亡率最高，为（24.97 ±2.45）%；④蛋白检测显示，与5%空白血清组比较，L-OHP （0.002，0.004，0.008 g·L-1）分别联用5% SBS后，Bax蛋白表达量明显上调（P<0.05），以L-OHP 0.008 g·L-1联用5% SBS组最高。分别与空白血清组、空白组比较，各用药组Bcl-2蛋白表达量均明显降低（P<0.05），其中以L-OHP 0.008 g·L-1联用5% SBS组最低。结论：参苓白术散能协同L-OHP抑制人结肠癌HCT116细胞增殖及凋亡，其作用机制可能是通过促进HCT116细胞增殖、诱导细胞凋亡、改变细胞周期分布、上调Bax蛋白表达及下调Bcl-2蛋白表达来实现的