基于人肝癌细胞系SMMC-7721的三维培养条件研究

目的 基于人肝癌细胞系SMMC-7721考察合适的海藻酸钠、氯化钙浓度，形成良好的海藻酸钙凝胶，优选三维条件下肿瘤细胞的培养条件。方法 在96孔板中培养SMMC-7721细胞，基于L9（34）正交表设计实验，以MTT法检测并计算氯化钙溶液、柠檬酸钠溶液不同浓度与作用时间下的细胞存活率；结合正交优选结果，考察适宜的海藻酸钠浓度，筛选适合的成胶、溶胶条件，并在三维培养模式下进行细胞活力确证。结果 最佳凝胶应用条件为1%氯化钙溶液与1%海藻酸钠溶液作用15 min内用于成胶，10%柠檬酸钠溶液作用凝胶10 min内用于溶胶，MTT法检测细胞存活率为94.97%。该三维培养条件下的肝癌细胞72 h内生长状态良好，存活率可达92.10%，细胞堆积紧密，出现肿瘤细胞球样聚集体。结论 本实验筛选出适合肿瘤细胞三维培养的成胶、溶胶条件。在该条件下培养肝癌细胞SMMC-7721，细胞生长状态良好，且细胞生长与聚集形态与传统二维培养存在差异，更接近细胞体内生存环境。基于该方法进行肿瘤细胞三维培养，可为深入研究肿瘤细胞生长状态，为抗肿瘤药物筛选提供更有利的方式